实验准备

在进行实验之前，需提前约半小时将培养基、PBS及胰酶预热至37°C。确保所有器材，包括2mL及10mL移液管、15mL离心管和WHB品牌的共聚焦爬片，均已准备就绪，并进行紫外消毒。

实验方法

尊龙凯时-人生就是博倡导的实验流程如下：

1. 从培养箱中取出培养皿，利用显微镜观察细胞状态，包括密度、形态及贴壁情况等。

2. 在超净台内，放入预热好的培养基、PBS和胰酶，点燃酒精灯，烧灼培养皿口以除菌，然后吸去原培养基。

3. 进行清洗：向培养皿底部加入7mL PBS（根据细胞状态适当调整量），轻轻前后摇晃，以彻底清洗细胞。

4. 进行消化操作：当观察到杂质清洗干净后，吸去PBS，加入3mL胰酶，静置5分钟（具体时间和量依据不同细胞调整）。5分钟后需观察细胞是否完全消化。

5. 如果细胞已被消化，向培养皿底部加入7mL培养基（根据观察到的细胞密度决定），以终止消化，并用移液枪轻柔吹打多次，使残留于壁上的细胞脱落，均匀混合后取少量进行计数。

6. 根据需要的细胞量进行稀释，将细胞悬液均匀滴满共聚焦爬片表面，放入培养箱。大约30分钟后，待细胞附着于爬片表面，再沿内壁添加培养基以继续培养。

7. 当细胞培养完成后，吸去废液，使用镊子夹住支架的侧面，轻松取出支架。

8. 握住支架两侧轻轻一拉，即可顺利取出爬片，继续后续的培养实验。

注意事项

1. 拿取培养皿时需小心，避免液体接触瓶口，每次打开瓶口前均需进行烧灼处理。

2. 操作时，确保没有其他物品横跨打开的培养皿，以降低污染的风险。

3. 由于贴壁细胞相对脆弱，因此所有加入培养皿的液体需提前预热至37°C，保证细胞的生存环境。

4. 倾斜共聚焦爬片时保持30°以上，轻拉以防止在瞬间拉开时爬片掉落，避免其破裂。

5. 此产品为一次性使用，使用前需确认爬片的正反面，并在打开后立即使用，以确保实验效果，充分体现尊龙凯时-人生就是博的实验理念。